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壓縮空氣測試中如何實施無菌技術(shù)

   【壓縮機網(wǎng)】在現(xiàn)代化工作環(huán)境中,人們90%以上的時間都花在封閉的空間中,例如倉庫、辦公樓和工廠。在大多數(shù)室內(nèi)環(huán)境中,空氣中含有多種化學(xué)和微生物顆粒,這些通常被定義為室內(nèi)污染物,它們會嚴重影響人體健康和產(chǎn)品質(zhì)量(1)。食品和飲料,醫(yī)療設(shè)備和藥品制造商等行業(yè)依靠其合理性測試來確定工作流程中是否存在對產(chǎn)品的產(chǎn)量和安全性有害的問題。如果室內(nèi)或室外的環(huán)境空氣中都存在污染物,那它們必然也存在于衣服、身體和設(shè)備上。當進行交叉污染合理性和達標性測試時(如壓縮空氣系統(tǒng)的微生物測試),某些污染物(例如細菌、酵母菌和霉菌)存在,就會出現(xiàn)問題影響測試準確性。采用無菌技術(shù)就是為了防止這種情況出現(xiàn)。
 
  國際標準化組織(ISO)和美國藥典(USP)在測試時對每個微生物程序部分都使用了無菌技術(shù)。該技術(shù)用于避免被測試的壓縮空氣樣本與您自己和周圍環(huán)境中的污染物交叉污染。如果操作不當,測試結(jié)果則會出現(xiàn)誤報,并且常常會導(dǎo)致系統(tǒng)故障,從而使得成本增加還要承擔維護或重新測試的費用。本文將重點了解無菌技術(shù)在壓縮空氣微生物檢測中的發(fā)展,實施和重要性。
 
  評估樣品位置
 
  要了解無菌技術(shù)首先需要了解微生物如何與周圍環(huán)境相互影響的。所說的環(huán)境包括壓縮機和使用點附近的環(huán)境空氣,采樣設(shè)備以及采樣技術(shù)人員本身。根據(jù)壓縮機所在的位置,它將吸入質(zhì)量水平不同的環(huán)境空氣。系統(tǒng)壓縮空氣,將其排入儲氣罐,然后在現(xiàn)場使用之前通過過濾器和干燥器系統(tǒng)(不是必需的,但強烈建議使用)后輸送空氣。一旦空氣通過管道分配到使用場地,就可以對其進行微生物污染測試。
 
  如果在使用點采樣區(qū)域周圍的環(huán)境中充滿灰塵或其他類型的顆粒物,則在采樣時,周圍空氣中的這些顆粒很可能會附著,影響微生物測試準確性。例如,我們發(fā)現(xiàn)一些工廠在進行分類、清潔或包裝某些商品的工作會產(chǎn)生大量顆粒物質(zhì)(如面粉、沙子、灰塵等),由于這樣的工作環(huán)境,幾乎不可能進行簡單的微生物學(xué)測試。這些顆粒物質(zhì)充當細菌,酵母或霉菌的媒介,并將其帶到新的位置。同樣可以帶到用于采樣的瓊脂糖板上。微生物非常小,很容易從一種環(huán)境傳播到另一種環(huán)境。像打噴嚏這樣簡單的事情可以在房間內(nèi)傳播數(shù)百萬種細菌。首先對周圍空氣中顆粒物含量高的區(qū)域進行風險評估,是評估使用點是否為測試必需點的好方法。如果由于無法以一定程度的清潔度取樣而導(dǎo)致交叉污染,很可能產(chǎn)生不準確的結(jié)果,則可能需要將取樣器預(yù)裝在更“干凈”的區(qū)域。這可以幫助獲得使用點的更多較準確結(jié)果。由于嚴格的規(guī)定和合規(guī)性程序操作,藥品和醫(yī)療設(shè)備的操作可能不會遇到此類問題。
 
  自我評估
 
  無菌技術(shù)的主要目標是消除樣品與外部微生物樣品污染的可能性。最大的問題是人體中充滿了有益的和潛在的致病微生物。這些生存在人體內(nèi)和體表。一些簡單的個人防護設(shè)備和一些消毒劑可以幫助防止交叉污染。

  手套
 
  PPE的第一件也是通常最有效的是準備一雙干凈的、合適的檢查手套(機械或布制手套是不同的)。不合適的手套的手指產(chǎn)生的松散的乳膠或腈綸可能會掉落到瓊脂糖板的表面并對其造成污染。檢查用的手套會在您和采樣介質(zhì)(通常是非選擇性瓊脂糖)之間形成一道屏障。疾病控制與預(yù)防中心指出,保持雙手清潔是我們可以采取的最重要的步驟之一,可以避免細菌傳播給他人和其他表面(2)。人們上過廁所、處理生肉、觸摸粘膜、觸碰衛(wèi)生狀況差的東西以及接觸其他受污染的物體(如門、把手、桌子),微生物就會接觸到手上。保護壓縮空氣微生物樣本免受污染是確保報告結(jié)果準確的最佳方法。一旦戴上手套并噴上消毒劑(乙醇、漂白劑或異丙醇)后,請勿觸摸工作表面以外的任何表面。人們通常甚至沒有意識的觸碰到他們的眼睛、鼻子和嘴巴。如果存在交叉污染的可能性,請在測試之前更換手套或清潔手套表面。
 

  實驗室外套/圍裙
 
  要注意衣服和手臂也是潛在的污染源。干凈、合適、可清洗或一次性的實驗室外套是PPE的另一種必要形式,它可以避免在采樣和測試過程中附著在衣服和皮膚上的微生物脫落到瓊脂糖板上。這些實驗室外套需要清洗。臟的實驗室外套和根本沒有穿實驗室外套情況是一樣的。此外,如果有溢出物(酒精或消毒劑)或瓊脂糖板掉在身上,穿著實驗室外套將使您保持清潔。

  面具
 
  人們通常不會意識到有多少微生物附著在他們的嘴巴和鼻子里。人口腔中的微生物眾多,有一項名為“人口腔微生物組”的專門研究組織(3)。平均一張嘴可以容納60億個多種細菌,與73億人口的地球相比,這個數(shù)字令人震驚。每次我們說話、咳嗽、打噴嚏、呼氣的時候,唾液和微生物都會離開我們的嘴和鼻子。這些飛沫中的大多數(shù)微生物會降解無法長時間存活,但研究表明,打完噴嚏后,微生物可以在生物氣溶膠(噴嚏或咳嗽的液體)中存活最長時間為45分鐘(4)。因此,打開瓊脂糖等微生物測試板時,遮住鼻子和嘴很重要。
 
  消毒劑
 
  消毒劑是用于消除或減少物體表面上有害微生物的溶液。使用消毒劑跟殺死所有微生物的滅菌過程不同。數(shù)百年來,酒精一直被用作消毒劑。醇基消毒劑中最常見的是乙醇和異丙醇。由于某些微生物(如細菌)的結(jié)構(gòu),暴露于體積分數(shù)70%乙醇或異丙醇醇的溶液將導(dǎo)致生物體的外細胞膜降解并最終死亡。當酒精濃度高于或低于70%時,效果反而不會很好。體積分數(shù)10%漂白劑(次氯酸鈉)的溶液像酒精一樣通過降解微生物的蛋白質(zhì)而導(dǎo)致細胞死亡。使用消毒劑噴涂手套,工作臺和采樣器內(nèi)部的表面,這些簡單操作足以在使用點之間保持清潔,以獲得準確的結(jié)果。
 
  當使用無菌技術(shù)測試壓縮空氣微生物樣品時,這些必要的PPE物品是可以有效避免交叉污染的。如果技術(shù)人員有胡須或長發(fā),則始終建議使用發(fā)網(wǎng)。當使用消毒噴霧劑和準備壓縮空氣進行采樣時保護眼睛非常重要。
壓縮空氣測試中如何實施無菌技術(shù)
 
  培訓(xùn)無菌技術(shù)(表1)
 
  足夠的無菌技術(shù)培訓(xùn)包括許多組成部分。其中包括測試環(huán)境的準備,測試人員準備和產(chǎn)品操作(5)。表1是根據(jù)Brown的圖表改編而成,其中概述了符合ISO 8573-7標準的壓縮空氣(沖擊取樣器)微生物測試的培訓(xùn)準則。使用培訓(xùn)大綱的目的是允許對績效進行評分并確定特定領(lǐng)域,以便將來進行重新培訓(xùn)。該表包含要評估的部分,基于標準描述的等級及其引起污染,需要改進或在實踐中可接受的可能性。
 
  需要評估的部分包括個人防護設(shè)備,消毒劑和清潔規(guī)程,采樣設(shè)備的操作以及設(shè)備的使用,檢查最終產(chǎn)品并且包裝樣品以便運輸或處理。這些都包括無菌技術(shù)流程,該流程將限制或消除從采樣設(shè)備到樣板分析過程中的任何交叉污染情況。操作人員應(yīng)充分閱讀標準,并使其應(yīng)用到所使用的采樣設(shè)備。該標準的大部分內(nèi)容足夠廣泛,可以由所有技術(shù)水平人員實施。同時建議在經(jīng)過理解無菌技術(shù)討論之后,進行技術(shù)人員技能的基準考核。該基線將使培訓(xùn)師了解哪些地方需要改進或哪些技能需要再次解釋概念。由于大多數(shù)清潔和費力的方案會隨著時間的推移而退化,因此建議每兩年進行一次評估,以評估技術(shù)是否隨時間推移更新。
 
  壓縮空氣系統(tǒng)中的微生物表明與進水附近的廢水相關(guān)的病原體有潛在存在的可能性,系統(tǒng)配管的預(yù)防性維護不夠全面以及標準要求不夠完整。要確保人員有足夠的準備從任何設(shè)施系統(tǒng)中采樣微生物,全面而有依據(jù)的培訓(xùn)至關(guān)重要。壓縮空氣系統(tǒng)是獨特的;ISO和USP具有專門設(shè)計的用于微生物污染物分析的標準,這些標準利用了陰性對照,百葉窗和無菌技術(shù)。正確操作完成后,結(jié)果將以清晰的采樣日圖像呈現(xiàn)。如果遵循ISO 8573-7標準,則將存在無菌空白樣本(陰性對照伴隨測試樣品但從未打開),兩個百葉窗分別在采樣之前和之后測試技術(shù)人員的無菌技術(shù),還有實際使用處的樣本。如果任何ISO 8573-7百葉窗都含有污染物,則很難說清楚是哪個系統(tǒng)污染了測試板,因為測試板也具有污染源(周圍環(huán)境或壓縮空氣)。更具體地說,如果前百葉窗被2個菌落形成單位(CFU)污染,并且使用點測試板被1 CFU污染,而后百葉窗沒有明顯的污染,那么現(xiàn)在對使用處的數(shù)據(jù)要進行一定程度的審查。不能保證測試板上的污染與前百葉窗的污染不同。同樣,如果百葉窗被污染但壓縮空氣樣品未被污染,則應(yīng)重新評估采樣技術(shù)人員的無菌培訓(xùn)。理想的情況是百葉窗很干凈和低于極限的測試板報告。
 
  總而言之,不能取消對人員進行無菌技術(shù)培訓(xùn)。微生物結(jié)果可以表明是否充分遵循了操作規(guī)程或是否需要進行再培訓(xùn)。無論哪種情況,進行文件記錄和半年培訓(xùn)評估都可以幫助更新技術(shù)和形成準確的壓縮空氣微生物報告。被污染的百葉窗和壓縮空氣微生物樣品會增加重新測試費用和人工成本,測試結(jié)果誤報可能導(dǎo)致使用點的關(guān)閉以及如果召回產(chǎn)品則會降低產(chǎn)品的完整性。
 
  作者簡介
 
  Maria Sandoval在微生物學(xué)和分子生物學(xué)方面擁有15年以上的經(jīng)驗。她的現(xiàn)場工作包括分析從俄羅斯貝加爾湖深處到切爾諾貝利50公里禁區(qū)的極端微生物。此外,她還與CDC一起使用DSHS分析和診斷患者的菌群。她在勞倫斯伯克利國家實驗室、州衛(wèi)生服務(wù)部、德克薩斯大學(xué)MD安德森癌癥中心的任職期間的優(yōu)秀表現(xiàn),使她成為微生物檢測領(lǐng)域的領(lǐng)先專家。作為Trace Analytics的微生物學(xué)家和實驗室主任,她負責微生物測試和程序開發(fā)。
 
  Trace Analytics是A2LA認可的實驗室,專門從事食品和飲料生產(chǎn)設(shè)施的壓縮空氣和氣體測試。他們使用ISO 8573采樣和分析方法,對壓縮空氣中發(fā)現(xiàn)的顆粒(0.5-5微米)、水、油霧、油蒸氣和微生物污染物進行了實驗室測試。在過去的29年中,他們一直堅持最高的健康和安全行業(yè)標準,并在全球范圍內(nèi)按照ISO、SQF、BRC和FDA的要求提供較高的質(zhì)量服務(wù)。
 
  參考文獻
  1. Tamburini, E., Donega, V., Marchetti, M.G., et.al. (2017, July 17). Study on Microbial Deposition and Contamination onto Six Surfaces Commonly Used in Chemical and Microbiological Laboratories. Int. J. Environ Res Public Health. 12(7):8295-8311.
  2. Centers of Disease Control and Prevention. (n.d.) Show Me the Science- Why Wash Your Hands? Retrieved April 15, 2019 from, https://www.cdc.gov/handwashing/why-handwashing.html? s_cid=ostltsdyk_cs_679.
  3. Human Oral Microbiome Database. (n.d.) Human Oral Microbiome. Retrieved April 15, 2019 from, http://www.homd.org/.
  4. Bowler, J. (2017, June 20). Bacteria in your Coughs and Sneezes Can Stay Alive in the Air for up to 45 Minutes. Retrieved April 18, 2019 from, https://www.sciencealert.com/bacteria-in-your-coughs-andsneezes-
  can-stay-alive-in-the-air-for-up-to-45-minutes.
  5.Brown, M.C., Conway, J., Sorensen, T.D. (2006, December 15). Development and Implementation of a Scoring Rubric for Aseptic Technique. Am J Pharm Educ. 70
 

來源:本站原創(chuàng)

標簽: 測試技術(shù)  

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